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細胞培養(yǎng)基的常見成分及功能介紹

發(fā)布時間:2021-01-21 11:04:18 點擊次數(shù):2001

介紹細胞培養(yǎng)基的常見組成和功能!

中國微生物菌種查詢網(wǎng):開展過哺乳動物細胞培養(yǎng)的任何人都明白典型的細胞培養(yǎng)基配方:將1瓶DMEM,10%的血清和一些其他成分混雜在一起以培養(yǎng)細胞以維系其生存能力。這些成分的功能是什么?

1.能源

每種生長培養(yǎng)基都需細胞代謝的碳源,碳源通常是葡萄糖,但也可以是其他糖,例如半乳糖,己糖,果糖或其他碳源(例如丙酮酸,谷氨酰胺)。通常以5.5mM的最后濃度添加葡萄糖,這大概相等人體血液中的葡萄糖水準,但是您可以購買兼具多種葡萄糖濃度的培養(yǎng)基來滿足您的特定需要。甚至可以購買不含葡萄糖的培養(yǎng)基,然后自定義濃度以模擬高糖糖尿病情況或研究低糖應激反應。

2.緩沖液

細胞需從7.2到7.4的特別pH值,否則它們將無法很好地發(fā)揮細胞功能以推動生長和存活。在二氧化碳含量高的培養(yǎng)箱中,二氧化碳與水反應生成氫離子,從而使細胞酸化。為了中和二氧化碳產(chǎn)生的酸度并在培養(yǎng)基中保持jiapH值,大多數(shù)培養(yǎng)基使用化學緩沖系統(tǒng),但是某些緩沖方式會干擾細胞生長。

哺乳動物細胞changjian的緩沖系統(tǒng)是碳酸氫鈉,有著很小的生物學影響。碳酸氫鈉與氫離子反應生成二氧化碳,將其隔絕以保持pH值。但是,碳酸氫鈉的一個弱點是要避免pH值對生理jia的緩沖功用,請注意,為避免此疑問,研究人員時常使用替代方式(例如HEPES)來增加某些傳媒類別的緩沖能力。

三,酚紅

由于維系pH值對于細胞培養(yǎng)至關最主要,因此許多培養(yǎng)基配方都涵蓋酚紅指示劑pH,它在酸性條件下(<6.8)變?yōu)辄S色,而在堿性條件下(>8.2)變?yōu)榉奂t色。,酚紅可以模擬雌激素,因此在培養(yǎng)表述雌激素受體的細胞種類時通常將其排除。不含酚紅的培養(yǎng)基可以用以比色測定,例如MTT細胞增殖實驗,苯酚的色譜圖干擾分光光度法測量的讀數(shù),從而使結果紛亂。

四,血清

在許多培養(yǎng)系統(tǒng)中,最主要成分是血清,通常是胎牛血清FBS。血清來自血液,是糖,鹽,脂質(zhì),生長因子等許多成分的混合物,由于其生物體來源因此,由于每批血清都帶有杜伊烏爾,因此很難保持可再生性。為避免此疑問,一些實驗室使用化學概念的血清替代品,而一些實驗室購買了整批特定血清以保證結果一致。

5.代謝物,維生素和礦物質(zhì)

DMEM的成分清單主要分成三類:氨基酸,維生素/輔因子和無機鹽(包括鈣和鎂),這些成分中的許多在所有細胞培養(yǎng)基中都是常見的,并且其組合和濃度早已達到然而,許多實驗室選擇在培養(yǎng)基中添加額外的非必需氨基酸以以防細胞使用葡萄糖或谷氨酰胺展開合成。此外,一些公司還生產(chǎn)無鎂和鈣培養(yǎng)基用以特定研究,請選擇時請精心檢驗。

六,抗生素

許多實驗室在其細胞培養(yǎng)物中添加了抗生素,以防范危害細菌或真菌的生長。甚至無菌工作。chang也使用青霉素和鏈霉素(pen /strep)的組合,在完整的細胞培養(yǎng)基中,最后濃度是青霉素50-100IU/mL和鏈霉素50-100g/mL。但是,有些實驗室選擇不使用抗生素,因為它們會對細胞產(chǎn)生不好影響或掩飾少量細菌污染。根據(jù)您的需,您可以決定是不是在培養(yǎng)基中使用抗生素。