固相萃取儀在檢測食品中三聚氰胺檢測中的應用

發(fā)布時間：2021-01-28 15:39:53 點擊次數(shù)：278

三聚氰胺是關鍵的氮雜環(huán)有機化工原料。它的水溶液是弱堿性的，可溶于甲醇，乙酸等，微溶于水和乙醇，不溶于C4H10O，苯等，并且在c-18色譜柱上的傳統(tǒng)保留時間較差。為此，人們一般而言用到離子對試劑液相色譜法和lc/ms進行檢測。但是，由于食品基質(zhì)的復雜性，樣品處理至關舉足輕重。我們采用三種酸提取法固相萃取小柱純化，輔以通過固相萃取儀操作，成立一套迅速，可靠和可重現(xiàn)的樣品處理方式。

主要儀器和試劑

高效液相色譜儀，裝備四個yuan梯度泵，在線真空脫氣機，自動進樣器，柱溫箱，二極管陣列檢測器，固相萃取儀，超聲波清洗器，離心機，固相萃取小柱：OASISMCX，6ml，500mg。三聚氰胺標準化產(chǎn)品，純度99％。

樣品處理

提?。簤核椴⒒祀s后，精確稱取5.0g樣品，加入50醋酸1％trichloromL溶液和2ml2％乙酸鉛溶液，充分混合并用超聲波提取30分鐘，然后在高溫下離心加快并取出上清液，以備稍后純化。

純化方法：將固相萃取小柱（6ml，500mg）放在固相萃取儀樣品架上，加5mlSPE 柱，5ml水進行活化，然后精確吸取5.0ml離心液到色譜柱上。將樣品架移至頂部，并通過調(diào)節(jié)面板旋鈕調(diào)節(jié)n2氣流以控制流速不超過1ml/min。然后用5ml水和5ml甲醇洗滌洗脫液，棄去洗脫液用氮吹儀，將小柱升至頂部，調(diào)節(jié)空氣閥旋鈕以自動加壓并干燥小柱，用5ml的5％氨甲醇溶液洗脫，搜集甲醇吹干，用甲醇-水（2：8，v/v）稀釋至1.0ml，通過0.45μm的濾膜，并在機械上進行測量。

樣品提取與純化

三氯醋酸有著沉淀乳及其產(chǎn)品蛋白質(zhì)的功用，并有助于三聚氰胺的分解。由于三聚氰胺是弱堿性的陽離子（弱陽離子化合物），因此通過陽離子交換柱進行純化可達到除去雜質(zhì)的功效，從而提高了檢測靈敏度，重現(xiàn)性和回收率。

固相萃取儀的申請

固相萃取儀高效簡便，可通過裝置中的氣流調(diào)節(jié)閥控制小柱的流速，并可直接吹干小柱，以確保每個小柱在活化和洗脫過程中均兼具不錯的重現(xiàn)性可以與不同標準的固相萃取小柱（例如1ml，3ml，6mL等）一同用到，一次可以同時處理48個樣品。我們添加了（2.0?50.0）ug/mL和在奶粉中加入其他不同濃度的三聚氰胺，并進行了加標回收率和重現(xiàn)性實驗?；厥章试?5％到99％之間。相對標準偏差低于3％。

結論

固相萃取儀的加壓操作是通過在固相萃取小柱之上強加一定的空氣壓力或n2來實現(xiàn)的。

這樣可以加速過濾速度，控制整個色譜柱活化，洗脫和洗脫過程的流速，使溶液可以輕松進入固定相孔隙，有利樣品液和固定相之間的緊密觸及，克服了常規(guī)手動操作時間，無法確保平穩(wěn)流量，不同人員操作結果錯誤大的疑問，并通過簡便的控制掃除了人為操作的偏差，確保在短時間內(nèi)同時處理數(shù)十個樣品，并具不錯的結果可重復性。